三维荧光光谱的原理三维荧光光谱是一种矩阵光谱(激发-发射-矩阵光谱),其特征在于激发波长(y轴),发射波长(x轴)和荧光强度( z轴),也称为总发光。光谱(TotalluminescenceSpectra)。通常的荧光光谱是通过相对于发射波长扫描荧光强度而获得的平面图。显然,三维荧光光谱技术不仅可以获取激发波长和发射波长,还可以获取变化时的荧光强度信息。物质的荧光强度F与激发光的波长和测得的发射光的波长有关。 F的数据以矩阵形式表示。行和列对应于不同的激发光波长和发射光波长。每个矩阵元素都是激发光。在光和发射光的波长处的荧光强度F称为激发发射矩阵,简称EEM。描述荧光强度与激发波长和发射波长的变化之间的关系的图是三维荧光光谱。三维荧光光谱法有两种形式。三维荧光光谱表示方法三维荧光光谱图的表示方法有两种,即三维投影图和轮廓荧光光谱图。三维投影图三维荧光光谱收集样品的总荧光数据,该数据是一系列荧光激发光谱和发射光谱的集合。扫描数据通常由计算机收集,通常以发射波长为x轴,激发波长为y轴,荧光强度为z轴,以形成三维投影图。在绘制时,y轴的激发波长可以从小到大,而得到的是前视图,或者可以从大到小,而得到的是后视图。在23°C的pH值为7.40的水溶液(磷酸盐缓冲液)中记录的人类血浆的总荧光三维投影的正视图。该系统最强的荧光峰在紫外线区域,而可见光区域的荧光强度要低得多。在计算机收集轮廓光谱的总荧光扫描数据后,使用计算机程序或三维自动绘图仪将发射波长用作x轴,将激发波长用作傍晚轴。用线将具有相等荧光强度的点连接起来。首先,在平面上形成一个等高线图,称为等高线荧光光谱图。三维荧光光谱可以测量什么? 1)使用血液轮廓荧光光谱法检查人体健康。人体血液由许多成分组成,但只有少数成分对总荧光有影响。当人体出现问题时,总荧光的可见部分会发生显着变化。在积累大量主要成分的荧光光谱数据的情况下,可以从血液的轮廓荧光光谱中了解和诊断疾病的状况。 2)三维荧光光谱法有助于解决刑事案件。与气相-液相色谱法相比,三维荧光光谱法具有更高的分辨两个汽油样品是否相同的能力。特别是,频谱减法的使用对于确证刑事案件确实很有帮助。例如,在纵火案现场获得了少量未燃烧的汽油样品,还从犯罪嫌疑人那里获得了汽油样品。为了确定罪魁祸首,可以采用三维荧光光谱相减法进行分析和判断。在测量期间,将两个样品分别溶解在光谱纯的己烷中以制备25ppm的分析测试溶液,然后测量三维荧光光谱以获得总荧光数据。然后计算机将两个样品的三维荧光光谱相减以获得残留光谱。如果两个样品来自同一来源,则所得的减光谱将是平坦的,并且在任何点的荧光强度将基本等于零。如果两个样本不是来自同一来源,则所得的减法谱将不会平坦,并且将有许多小的“山丘”。